FLIM-System LIFA
LIFA ist ein vollständiges System zur Messung von zeitaufgelöster Fluoreszenz bzw. FLIM (Fluorescence Lifetime-Imaging Microscopy). Es kann sehr einfach an alle gängigen Fluoreszenzmikroskope angeschlossen werden und erlaubt extrem schnelle Bildaufnahmen, sowohl was die Messzeit in wenigen Sekunden angeht, als auch die aufgenommenen Prozesse von 0 – 300 ns mit einer Genauigkeit von 30 ps.
Die von Lambert Instruments hergestellten Verstärker Gen II und Gen III sind im Setup verbaut und sorgen für höchste Auflösung und Sensitivität, selbst bei geringer Fluoreszenz im Spektralbereich von UV bis NIR.
Das gesamte System besteht aus einer modulierbaren und verstärkten CCD-Kamera, einer modulierten Lichtquelle (LED oder Laser), einer Steuereinheit für die Modulation und einem Computer mit LI-FLIM Software. Als Kamera wird entweder eine HiCAM von Lambert Instruments verwendet, oder die speziell für LIFA konzipierte Kamera vTau.
LIFA kann mit einem eigenen PC-Setup verwendet werden (PC-Anforderungen siehe Tabelle Spezifikationen). Für herausforderndere Anwendungen bietet Lambert Instruments das Setup STAMINA an, welches Steuerung (PC, Software) mit Verstärkern und Kameras verbindet.
Das System LIFA-TD ist eine günstigere und einfachere Version im Vergleich zum LIFA, dort wird die TRiCAM von Lambert Instruments integriert. Das gesamte System besteht aus TRiCAM und gepulster Lichtquelle, die an einem Fluoreszenzmikroskop angeschlossen werden. Damit lässt sich TD-FLIM (Time Domain Fluorescence Lifetime-Imaging Microscopy) mit einem Setup als „turn-key solution“ messen, die Software synchronisiert dabei automatisch Lichtquelle und Kamera, ebenso können mit der Software aus den Aufnahmen direkt Lifetime-Ergebnisse berechnet werden.
Anwendungen
- Zeitaufgelöste Bildgebung und Spektroskopie
- Zeitabhängige Fluoreszenz
- FLIM (Fluorescence Lifetime-Imaging Microscopy)
- FRET (Förster-Resonance Energy Transfer)
- Abbildung von NADH/FAD Prozessen durch Fluoreszenz
- Transportprozesse in Membranen
- Auflösung von Sauerstoffkonzentrationen
- Wechselwirkungen zwischen Molekülen, bis hin zu Proteinen
Software und Zubehör
- Gepulste Lichtquellen von Lambert Instruments, wahlweise LED- oder laserbasiert
- Verstärker-Kontrollmodul für automatisierte Messungen, Limitierung des Anodenstroms zum Schutz des Verstärkers und erhöhte Verstärkerleistung
- Umfangreiches Training vor Ort durch Lambert Instruments
- Capture Software
- Intensifier Control Software
LIFA Spezifikationen
| System Performance | |
|---|---|
| Lifetime range | 0 - 300 ns |
| Lifetime resolution | < 100 ps (single pixel) |
| Speed | 2 lifetime images per second (full frame) |
| Spatial resolution | 26 lp/mm (Gen II); 19 lp/mm (Gen III) |
| Sensitivity | Single photon |
| Intrascene dynamic range | 12 bit |
| Camera input format | 1 inch |
| Effective pixel size | 10.3 µm square (12.9 µm for lens coupled CCD) |
| System requirements | |
|---|---|
| Operating system | Windows 7 Professional 64-bit |
| Processor | Intel Core 2 Duo, 3 GHz |
| Memory | 4 GB |
| Hard disk | 300 GB |
| Monitor | 24'' LCD monitor, resolution 1920 x 1080 |
| System should include | DVD R, IEEE1394, LAN/Ethernet, USB 2.0, keyboard, optical mouse |
| System requirements (minimal) | |
| LI-FLIM | Acquisition and lifetime modules, full digital control of hardware, viewer and image analysis tools; external control via ActiveX |
| Software development kit (SDK) for CCD camera and control unit | Offers full programmatic (C/C++) control of camera and of control unit functionality |